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    水中微生物检测

    1 基本原理:细菌总数是指水样在一定条件下培养后所得1ml水样所含菌落的总数。 总大肠菌群系指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便,具有指示菌的一般特征,故以此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量。水中总大肠菌群数系以100ml水样中污染的总大肠菌群最可能数(MPN)表示。  按国家饮用水卫生标准规定,1毫升自来水中杂菌数不得超过100个,大肠菌群数1000毫升水中不得超过3个才算合格。
    2 材料:营养琼脂、乳糖胆盐发酵培养基、酒精、棉签、培养皿、无菌广口瓶 
    3 方法:
    3.1 采样(自来水):先将水龙头打开,放水1~2分钟后,关闭水龙头。用酒精棉球灼烧龙头三分钟灭菌,再开放水龙头使水流5分钟,用无菌瓶收集水样。
    3.2 细菌总数检查:
    3.2.1 用灭菌吸管吸取1ml水样,注入灭菌培养皿中,共做2个。 
    3.2.2 分别倾注约15ml已熔化冷却至45℃左右的营养琼脂,混匀后置37℃培养24小时进行菌落计数,同时应作一空白对照。两个培养皿的平均菌落数即为水样1ml中的细菌总数。
    3.3 大肠菌群数检查:乳糖发酵试验→分离培养→证实试验→报告
    3.3.1 乳糖发酵试验:自来水的接种方法:在2个装有50ml三倍料乳糖胆盐发酵液的三角瓶中,各加入100ml水样;在10支装有5ml同样发酵的试管中,各加入10ml水样,混匀。将上述各发酵管(瓶)置36±1℃温箱内,培养24±2小时,观察结果。如所有发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性;如有产气者,则按下列程序进行。 
    3.3.2 分离培养:将产气的发酵管用接种环分别以划线法转接于伊红美兰琼脂平板上,置36±1℃温箱内,培养18~24小时,取出观察菌落形态。  
    3.3.3 证实试验:在每个平板上,挑取可疑菌落(紫黑色或淡紫红色,有或略有或没有金属光泽的菌落)1~2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36±1℃培养24±2小时进行复发酵试验,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的芽孢杆菌即可报告为大肠菌群阳性。
    4 报告:每毫升自来水所含菌落数以个/mL表示;根据证实为大肠菌群阳性的管数,查大肠菌群检索表,报告每升水样的大肠菌群的最可能数。
    注:本文参照GB5750-85《生活饮用水标准检验方法》

     
     
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